肾脏特异性高表达支架蛋白JLP转基因小鼠的构建

作者：袁小涵; 宋远; 朱凯; 田茂青; 张璐; 陈朝威; 颜奇; 王惠明^*

来源：武汉大学学报(医学版), 2020, 41(01): 10-14.

DOI：10.14188/j.1671-8852.2019.0093

• JLP
• C57BL/6N转基因小鼠
• T2" name="keyword">KSP-CreERT2
• Cre-Loxp系统

目的:构建肾脏特异性高表达支架蛋白JLP的转基因小鼠模型。方法:将遗传背景为C57BL/6N的loxp-stop-loxp-mSpag9阳性小鼠与KSP-CreERT2阳性小鼠进行饲养和繁殖,提取其子鼠脚趾DNA,采用PCR方法鉴定基因型,获取基因型为loxp-stop-loxp-mSpag9+/KSP-CreERT2+小鼠,待其长至4～6周龄时予以他莫昔芬诱导Cre重组酶表达。选择同窝C57BL/6N野生型小鼠作为对照,并通过Western Blot及组织免疫荧光检测小鼠各脏器中JLP的表达量,进一步验证肾脏特异性高表达mSpag9转基因小鼠的准确性及特异性。结果:Western Blot及组织免疫荧光结果显示:经他莫昔芬诱导的loxp-stop-loxp-mSpag9+/KSP-CreERT2+小鼠肾脏中JLP表达量显著高于同窝野生型小鼠,心脏、脾、肺、睾丸等组织中表达量无差异。结论:成功构建肾脏特异性高表达支架蛋白JLP的转基因小鼠,为进一步研究JLP在肾脏疾病中的作用及其机制提供了动物模型。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院; 武汉大学人民医院