携带人PPARα基因高效真核表达载体的构建及其意义

作者：章涛; 杨贵忠; 袁野; 李苌清; 万敬员; 蒋建新; 周岐新

来源：中国药理学通报, 2007, (03): 413-417.

• 过氧化物酶体增殖物激活受体α
• 基因克隆
• 真核表达 peroxisome proliferator-activated receptor α
• gene cloning
• eukaryotic expression

目的构建可以高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体(αhPPARα)的真核细胞表达载体,为筛选作用于PPARα受体的药物提供分子平台。方法将HepG2细胞总RNA经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)克隆hPPARα全长基因,用BamHⅠ、SalⅠ双酶切后,与相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建phPPARα-IRES2-EGFP重组质粒,用酶切及基因测序鉴定重组质粒中hPPARα基因的完整性和可靠性;重组质粒转染293细胞,荧光显微镜观察EGFP报告基因表达强度,并对转染细胞的hPPARα表达进行荧光定量PCR及免疫细胞化学检测。结果经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的2...

• 单位
  重庆医科大学; 创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室; 第三军医大学