重组枯草芽孢杆菌表达4-木糖醇脱氢酶的发酵和反应条件优化

作者：朱雯惠; 孟青; 江波; 张涛^*

来源：食品与发酵工业, 2019, 45(09): 21-28.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019042

• 4-木糖醇脱氢酶(xylitol-4-dehydrogenase
• XDH)
• L-木酮糖
• 重组芽孢杆菌

L-木酮糖(L-苏式-戊酮糖)是一种昂贵的稀有戊糖,而4-木糖醇脱氢酶(xylitol-4-dehydrogenase,XDH)是生物合成L-木酮糖(L-xylulose)的关键酶。为了促进L-木酮糖的生产,对枯草芽孢杆菌外源表达4-木糖醇脱氢酶的发酵条件进行优化,并对以木糖醇为底物静息细胞催化反应合成L-木酮糖的反应条件进行研究。通过单因素实验确定了最佳培养基的成分(g/L)为:蔗糖25,尿素6,MgSO40. 05,MnSO40. 01,FeSO40. 01,初始pH值8. 0。最佳发酵条件为:装液量40 mL(250 mL锥形瓶),接种量1. 67%,发酵培养温度28℃。在优化条件下4-木糖醇脱氢酶酶活为5. 183 U/L,与初始酶活相比提高了231. 2%。最优反应条件:底物质量浓度20 g/L,50mmol/L甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液(pH 10. 0),反应温度45℃,优化反应条件下转化率达到17. 74%。通过对菌株发酵和反应工艺条件的优化,为后续L-木酮糖工业化生产奠定了基础。

• 单位
  江南大学; 食品科学与技术国家重点实验室