环介导恒温扩增技术快速检测鼠疫耶尔森菌

作者：冯娜; 周亚洲; 范艳晓; 汪琼; 毕玉晶; 韩延平; 杨瑞馥; 周育森; 王效义

来源：军事医学, 2015, 39(11): 868-872.

• 鼠疫耶尔森菌
• 环介导恒温扩增技术
• 检测

目的建立简单、快速环介导恒温扩增技术(LAMP)检测鼠疫耶尔森菌的方法。方法基于鼠疫菌染色体上特异的核酸序列3a设计引物;应用浊度仪和目视法对反应结果进行检测;通过对鼠疫菌和其他近源菌同时进行检测评价方法的特异性;通过对不同稀释浓度的鼠疫菌DNA模板进行LAMP和PCR检测以确定方法的灵敏度。结果用建立的LAMP法对与鼠疫菌近源30种其他菌株进行扩增,结果均为阴性,该方法具有很高的特异性。LAMP法检测鼠疫菌DNA的灵敏度可达到20 pg,比常规PCR法高10倍。检测反应在25 min以内完成。结论该方法具有快速、灵敏、特异、操作简单的特点,有望发展成为现场快速检测鼠疫菌的有效手段。

• 单位
  安徽医科大学; 军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室