基于CRISPR/Cas9系统制作拟南芥糖基转移酶ugt79b2/79b3双突变体纯合株系

作者：滕霄; 郭伟岳; 李茹; 李攀; 张雨飞; 冀芦沙^*

来源：聊城大学学报(自然科学版), 2022, 35(02): 104-110.

DOI：10.19728/j.issn1672-6634.2021090004

• 拟南芥
• 糖基转移酶
• CRISPR/Cas9系统
• ugt79b2/79b3

CRISPR/Cas9系统在植物遗传改良及功能基因研究中有着非常重要的作用。本研究中,根据拟南芥糖基转移酶家族中同工酶UGT79B2/79B3的前体序列,设计针对靶基因UGT79B2/79B3的特异的sgRNA引导序列,构建ugt79b2/79b3-Cas9双突变植物表达载体,并转化到根癌农杆菌GV3101中。将含有目标载体的GV3101活化后,花浸染法浸染拟南芥。以后代阳性株系DNA作为模板,送公司测序。99株阳性转基因株系中分子鉴定发现有24株发生突变,其中只有1株发生ugt79b2/79b3双突变。该研究结果为拟南芥糖基转移酶ugt79b2/79b3突变体的功能开发提供了基础研究与方法支持。

• 单位
  生命科学学院; 聊城大学