siRNA抑制卵巢癌细胞株SKOV3 HPA基因表达的研究

作者：辛晓燕; 毛敬; 刘玉; 于月成; 李萍

来源：中国肿瘤生物治疗杂志, 2006, (02): 124-128.

• 小分子干涉RNA
• HPA基因
• 卵巢癌

目的：研究siRNA对卵巢癌细胞株SKOV3中乙酰肝素酶(heparanase,HPA)基因表达的抑制作用。方法：设计合成两对HPA编码基因的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,通过定向克隆至载体PGenesil-1,构建siRNA真核表达载体,经稳定转染SKOV3细胞后应用RT-PCR、real-time PCR及免疫组化技术检测卵巢癌细胞中HPA基因mRNA及蛋白表达水平的抑制情况。结果：测序证实成功地构建了编码2条shRNA的siRNA真核表达载体。通过RT-PCR、real-time PCR及免疫组化技术检测转染siRNA的SKOV3细胞,与对照组相比,HPA mRNA表达水平和蛋白表达水平明显降低。结论：构建的PGenesil-1(+)-HPA重组质粒能有效的抑制HPA基因在卵巢癌细胞株SKOV3中的表达,为研究HPA基因在肿瘤细胞中的调节途径和肿瘤的基因治疗提供了新的方法。

• 单位
  西京医院; 第四军医大学