8-溴乙氧基大黄酸的合成及其对肝癌HepG2.2.15细胞乙肝病毒抑制作用的研究

作者：潘智育; 李竟; 陈云龙; 王春苗; 彭政; 粟正英; 黎丹戎; 侯华新

来源：中国药理学通报, 2016, 32(08): 1175-1180.

• 8-溴乙氧基大黄酸
• 大黄酸
• 肝癌
• 乙型肝炎病毒
• HBx
• 细胞内钙离子

目的合成8-溴乙氧基大黄酸,探讨8-溴乙氧基大黄酸对肝癌Hep G2.2.15细胞分泌的乙型肝炎病毒表面抗原(HBs Ag)和e抗原(HBe Ag)的抑制作用和机制。方法以大黄酸为结构基础,化学全合成8-溴乙氧基大黄酸,采用红外光谱(IR)、核磁共振氢谱(1H-NMR)及碳谱(13C-NMR)对其结构进行表征;MTT法测定8-溴乙氧基大黄酸对细胞生长的抑制作用;ELISA检测Hep G2.2.15细胞分泌的HBs Ag和HBe Ag;Western blot法检测细胞内乙肝病毒X基因(HBx)蛋白的表达;流式细胞仪分析细胞周期;激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙离子浓度。结果 IR、1H-NMR和13C-NMR的结果确证合成产物为8-溴乙氧基大黄酸,合成产物和大黄酸对Hep G2.2.15细胞具有较好的抑制细胞生长的作用,作用72 h后IC50分别为14.29 mg·L-1和11.59mg·L-1。采用无细胞毒剂量的8-溴乙氧基大黄酸处理细胞后,对细胞分泌的HBs Ag和HBe Ag有抑制作用,其抑制作用随着浓度的增加,呈现剂量依赖性,且合成产物的抑制效果优于大黄酸;8-溴乙氧基大黄酸可降低HBx蛋白表达水平和细胞内钙离子浓度,阻碍乙型肝炎病毒(HBV)复制,但不影响细胞周期。结论本研究合成的8-溴乙氧基大黄酸显示了比大黄酸更为优越的抑制HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg的分泌作用的活性,其作用机制可能是通过降低HBx蛋白表达、减少钙离子浓度而实现。

• 单位
  广西医科大学附属肿瘤医院; 广西医科大学; 齐齐哈尔市第一医院