构建人工合成的微小低氧反应元件可调控的AAV载体

作者：聂小维; 孙立军; 郝跃文; 杨广笑; 王全颖

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2011, (03): 278-280+283.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005902

• 低氧反应元件(HRE)
• 重组腺伴随病毒
• 载体
• 低氧诱导 hypoxic-responsive element(HRE)
• recombinate adenoassociated virus
• vector
• hypoxia inducible

目的:人工合成微小HER,将其插入到AAV重组质粒的CMV启动子上游,采用磷酸钙沉淀法包装低氧反应元件调控的AAV重组病毒,为缺血性心脑血管病的基因治疗制备可以控制表达的AAV载体。方法:人工合成具有4次重复串联的低氧诱导因子结合位点(HIF-binding site,HBS)A/GCGTG(4×HBS)的36 bp核酸片段和插入到CMV启动子TATA Box上游的间隔区35 bp的核酸序列,并运用PCR方法扩增。测序正确后,通过常规分子生物学重组方法,将原AAV载体质粒中CMV启动子替换成为含有最小人工合成HRE的CMV启动子,重组构建了低氧反应元件调控的AAV载体。并在该载体CMV启动子下...

• 单位
  第四军医大学; 西京医院