摘要
目的:研究人诱导性调节性T细胞(iTreg)细胞表型的多样性变化,并比较PMA/Ionomycin和PHA两种多克隆刺激对人iTreg的诱导的异同。方法:用Ficoll密度梯度离心分离出人PBMC,空白对照组直接检测,其余则在细胞培养液(非刺激对照组)、PMA/Ionomycin溶液(PMA/Ionomycin刺激组)或PHA溶液(PHA刺激组)中培养16小时,以流式细胞仪检测CD4+CD25+FoxP3+CD127-、CD4+CD25+FoxP3+IL-2-、CD4+CD25+FoxP3+IL-10+、CD4+CD25+FoxP3+TGF-β+和CD4+CD25+FoxP3+IFN-γ+的表达。结果:空白对照组显示,约4%的CD4+细胞表达CD4+CD25+FoxP3+CD127-,即nTreg。PBMC在细胞培养液培养16个小时,iTreg的表达无明显变化,但经多克隆刺激后,各不同细胞表型的iTreg的表达明显上升(均P<0.01),表明多克隆刺激可以明显诱导人iTreg的产生。PHA对IL-2-和TGF-β+iTreg的诱导比PMA/Ionomycin强(P<0.01),但仅PMA/Ionomycin可以诱导产生CD4+CD25+FoxP3+IFN-γ+iTreg,而PHA不能诱导。刺激后产生的CD4+FoxP3+IFN-γ+PBL表达与CD25水平呈逆相关。结论:多克隆刺激可以诱导产生人iTreg,PMA/Ionomycin和PHA对人iTreg诱导的机制和程度不一样。多克隆刺激后产生的不同细胞表型反映了人iTreg的多样性变化。
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单位华中科技大学同济医学院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院