摘要
目的研究没食子酸对人舌鳞状细胞癌SCC15细胞自噬的影响及其相关的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测不同浓度没食子酸对SCC15细胞增殖的影响;单丹磺酰尸胺染色法(monodansylcadaverine, MDC)检测没食子酸对SCC15细胞自噬体形成的影响;应用Western blot方法检测没食子酸对SCC15细胞自噬相关蛋白LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin1表达情况的影响,以及对PI3K/Akt/mTOR通路中p-Akt、p-mTOR蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,90、120、150、300、600μmol/L没食子酸作用于SCC15细胞24、48 h后,SCC15细胞抑制率明显增加,且有一定的剂量依赖关系(P<0.05);MDC染色结果显示,300μmol/L没食子酸组细胞中散布于细胞质及核周的点状荧光颗粒(即自噬体)显著增多;Western blot结果显示,没食子酸作用SCC15细胞48 h后,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ增加、Beclin 1蛋白表达上调;p-Akt和p-mTOR蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论一定浓度没食子酸能够诱导SCC15细胞发生自噬,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR通路中p-Akt和p-mTOR蛋白表达,上调LC3、Beclin-1蛋白表达有关。
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单位大连大学附属中山医院