转甲状腺素蛋白介导STAT4/miR-223-3p/FBXW7通路对高糖诱导的人视网膜内皮细胞新生血管生成的影响

作者：焦军杰; 姚文艳; 张前辉; 李秀娇; 常昆; 马萧萧; 李晓鹏^*

来源：眼科新进展, 2023, 43(02): 99-104.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2023.0020

• 转甲状腺素蛋白
• 人视网膜内皮细胞
• 糖尿病视网膜病变
• 信号转导和转录激活因子4
• miR-223-3p
• F-box WD重复蛋白7

目的 分析转甲状腺素蛋白(TTR)介导信号转导和转录激活因子4(STAT4)/miR-223-3p/F-box WD重复蛋白7(FBXW7)通路对高糖(HG)诱导的人视网膜内皮细胞(hRECs)新生血管生成的影响。方法 将hRECs分为对照组、HG组、HG+TTR组、HG+NC mimic组、HG+miR-223-3p mimic组和HG+TTR+miR-223-3p mimic组。生物信息学分析STAT4与miR-223-3p的靶向关系，并采用双荧光素酶报告实验进行验证。ELISA检测细胞中TTR水平，RT-PCR检测miR-223-3p水平，CCK-8法检测细胞增殖，血管生成实验分析血管生成率，Western blot检测血管内皮生长因子(VEGF)、TTR、STAT4和FBXW7蛋白表达。结果 与对照组相比，HG组hRECs中TTR水平升高(P<0.05)。培养24 h时，与HG组相比，HG+TTR组细胞活力明显下降(P<0.05)。与HG组血管生成率(38.12±4.91)%相比，HG+TTR组hRECs血管生成率[(19.46±2.12)%]明显较小(P<0.05)。与HG+NC mimic组相比，HG+miR-223-3p mimic组hRECs中miR-223-3p表达上调，细胞活力增加(均为P<0.05);与HG+miR-223-3p mimic组相比，HG+TTR+miR-223-3p mimic组hRECs中miR-223-3p表达下调，细胞活力下降(均为P<0.05)。与HG+NC mimic组血管生成率(40.11±4.10)%相比，HG+miR-223-3p mimic组hRECs血管生成率[(61.52±6.25)%]增多(P<0.05);与HG+miR-223-3p mimic组相比，HG+TTR+miR-223-3p mimic组hRECs血管生成率[(42.24±4.33)%]减少(P<0.05),且与HG+NC mimic组比较差异无统计学意义(P>0.05)。生物信息学分析结果显示，STAT4与miR-223-3p启动子区域相互作用。与HG组相比，HG+TTR组hRECs中miR-223-3p、STAT4蛋白表达均降低，FBXW7和VEGF蛋白表达均升高(均为P<0.05);与HG+TTR组相比，HG+miR-223-3p mimic组hRECs中miR-223-3p、STAT4蛋白表达均升高，FBXW7和VEGF蛋白表达均降低(均为P<0.05);与HG+miR-223-3p mimic组相比，HG+TTR+miR-223-3p mimic组hRECs中miR-223-3p、STAT4蛋白表达均降低，FBXW7和VEGF蛋白表达均升高(均为P<0.05);与HG+TTR组相比，HG+TTR+miR-223-3p mimic组hRECs中miR-223-3p、VEGF、STAT4和FBXW7蛋白表达差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 TTR可能通过调节STAT4/miR-223-3p/FBXW7通路抑制HG诱导的hRECs的血管生成。

• 单位
  新乡医学院第三附属医院