Foxj2基因对羊驼黑素细胞黑色素生成的影响

作者：段志成; 董常生^*; 范瑞文; 谢建山; 杨玉静; 聂瑞强

来源：山西农业科学, 2023, 51(06): 702-708.

• Foxj2
• siRNA
• TYR
• 生物信息学
• 羊驼黑素细胞
• 黑色素

叉头框转录蛋白家族成员Foxj2(Forkhead Box J2)基因在U87细胞和U251细胞中与上皮-钙黏蛋白（E-cadherin,CDH1）的表达呈正相关，且CDH1参与黑色素的生成具有介导表皮-黑色素单位完整性的作用。为了验证Foxj2基因参与调节羊驼黑素细胞中黑色素的生成，采用PCR方法验证Foxj2基因在羊驼皮肤内的表达情况；采用生物信息学方法分析Foxj2与黑色素生成相关基因TYR以及Foxj2与黑色素的生成相关蛋白的关联性；合成Foxj2的siRNA和空载siRNA，构建沉默siRNA的羊驼黑素细胞模型，观察记录细胞的转染情况；使用Real-time PCR方法检测各组羊驼黑素细胞中Foxj2基因和黑色素生成相关基因TYR的mRNA变化；通过Western blot的方法检测比较各组细胞中Foxj2与TYR的蛋白水平的变化；提纯各组细胞的3种黑色素（总黑素、真黑素、褐黑素），使用酶标仪测各组细胞中3种黑色素的OD值并比较变化。结果表明，羊驼黑素细胞中检测到Foxj2基因表达；生物信息学分析得出，Foxj2基因在细胞内涉及运输氨基酸调控、生长因子等一系列作用，在Foxj2中存在的Forkhead结构域可以与TYR基因启动子存在结合位点；Real-time PCR结果显示，和NC组相比，沉默组中Foxj2的mRNA表达量极显著降低24 990%,TYR的表达量显著升高35%;Western blot结果显示，沉默组Foxj2的蛋白相对表达水平极显著降低25%,TYR的蛋白相对表达水平极显著升高25%。酶标仪波长分析显示，与NC组相比，沉默组的总黑素相对表达水平极显著升高88.0%，真黑素相对表达水平极显著升高21.8%，褐黑素相对表达水平极显著升高21.6%。抑制羊驼黑素细胞中Foxj2基因的转录可以升高羊驼黑素细胞中黑色素的生成，并且对黑色素生成的主要调控基因TYR起促进作用，说明Foxj2基因可能在羊驼黑素细胞中对于黑色素的生成起着调控作用。

• 单位
  山西医科大学; 基础医学院; 山西农业大学