一种适用于绿僵菌克隆筛选的DNA批量快速提取方法

作者：宋红生; 邓博严; 殷颖^*

来源：信阳师范学院学报(自然科学版), 2020, 33(01): 149-155.

• 机械珠磨
• 酚氯仿抽提
• DNA分离纯化
• 克隆筛选
• 凝胶电泳分析

基因组DNA的提取是最基本的分子生物学实验技术,介绍了一种适用于绿僵菌克隆筛选的DNA批量快速提取方法.研究结果表明:使用改良的察氏琼脂培养基(CDA)代替常用的土豆葡萄糖琼脂(PDA)培养绿僵菌,以钢珠振打破碎菌丝,配以简化的酚氯仿抽提操作,可以高效地提取高质量的真菌基因组DNA.本方法中,CDA菌落生长需2～3 d,双样品提取耗时约15 min,每个菌落可获得DNA数百纳克,片段长度在10 kb左右,电泳条带清晰可见.

• 单位
  生命科学学院; 上海大学; 上海生命科学研究院植物生理生态研究所