p75真核表达载体的构建及其在PC-3细胞中的表达

作者：陈昌杰; 汪华侨; 徐杰; 何蕴韶

来源：解剖学杂志, 2005, 28(02): 135-137+116.

DOI：10.3969/j.issn.1001-1633.2005.02.005

• p75
• 真核表达载体
• PC-3细胞

目的:构建人神经生长因子低亲和力受体p75真核表达质粒,并在前列腺癌细胞PC3中表达。方法:运用RTPCR技术从人脑胶质细胞瘤组织中分离扩增编码人p75完整基因,与pcDNA载体重组,并通过酶切和测序鉴定;用脂质体介导法将重组质粒转染到PC3细胞中,经G418筛选后,用RTPCR、间接免疫荧光化学和细胞免疫组织化学法在转录和翻译两个水平上检测表达产物。结果:酶切和测序证实所获得的重组质粒包含-p75完整基因;在转染pcDNA3.1(+)-p75的PC-3细胞中检测到转录和翻译产物。结论:成功地构建了-p75真核表达质粒并在PC-3细胞中表达,为深入研究p75在前列腺癌中的生物学功能奠定了基础。

• 单位
  解剖学教研室; 中山大学; 基础医学院