摘要
目的:探讨搭载不同浓度紫杉醇脂质体的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)静电纺丝膜对神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响,评价载有紫杉醇脂质体的PLGA静电纺丝膜在脊髓损伤组织工程修复中应用的可行性。方法:将紫杉醇脂质体和PLGA以不同比例混合,利用静电纺丝技术分别构建1、5和10μg·L-1紫杉醇脂质体PLGA静电纺丝膜。从胎鼠大脑组织中分离纯化NSCs。扫描电镜(SEM)检测各组紫杉醇脂质体PLGA静电纺丝膜纤维直径,免疫荧光染色鉴定分离纯化所得的NSCs。将NSCs分别培养在含有不同浓度(0、1、5和10μg·L-1)紫杉醇脂质体PLGA静电纺丝膜的培养基中(作为纯PLGA静电纺丝膜组和1、5及10μg·L-1紫杉醇脂质体PLGA静电纺丝膜组),MTT法检测各组NSCs增殖活性,RT-PCR法检测各组NSCs中Tuj-1和GFAP mRNA表达水平。结果:紫杉醇脂质体PLGA静电纺丝膜呈白色薄膜状。SEM检测,各组紫杉醇脂质体PLGA静电纺丝膜纤维直径比较差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光染色,从胎鼠脑组织中分离出的细胞呈球状,所有细胞均有Nestin蛋白阳性表达。MTT法检测,5μg·L-1紫杉醇脂质体PLGA静电纺丝膜组NSCs增殖活性高于其他3组(P<0.05)。RT-PCR检测,与纯PLGA静电纺丝膜组比较,5μg·L-1紫杉醇脂质体PLGA静电纺丝膜组NSCs中Tuj-1mRNA表达水平升高(P<0.05),GFAP mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论:中等浓度紫杉醇能够促进NSCs增殖,诱导NSCs向神经元分化。载有中等浓度紫杉醇脂质体的PLGA静电纺丝膜在脊髓损伤修复中有一定的应用价值。
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单位吉林大学第二医院; 一汽总医院