黑色素瘤抗原A3基因过表达对人肝癌细胞株的影响

作者：林青; 陈裕庆; 张永俊; 黄爱民; 张文敏

来源：中华实验外科杂志, 2014, 31(04): 760-762.

• 黑色素瘤抗原
• 癌,肝细胞
• 迁移
• 侵袭

目的观察黑色素瘤抗原A3(MAGE-A3)基因过表达对人肝癌细胞株增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响,探讨MAGE-A3基因在肝细胞癌发生发展过程中的作用。方法将MAGE-A3重组慢病毒表达载体(LV-MAGE-A3)感染人肝癌细胞株HepG2和MHCC-97H;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测MAGE-A3 mRNA和蛋白在肝癌细胞中的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)、平板克隆形成实验、Transwell迁移及侵袭实验检测MAGE-A3基因过表达前后肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力的变化;原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记DNA链断端分析法(TUNEL)检测肝癌细胞的凋亡,流式细胞术(FCM)分析细胞周期的改变。结果病毒感染肝癌细胞120 h荧光达到最强且稳定,感染效率可达80%。RT-PCR和Western blot检测证实经LV-MAGE-A3感染的细胞高效表达MAGE-A3 mRNA与蛋白。HepG2和MHCC-97H细胞经LV-MAGE-A3感染后,迁移细胞数达到(187.00±13.52)、(121.00±4.16)个,侵袭细胞数达到(164.00±9.64)、(59.50±1.00)个,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);FCM检测发现S期细胞比例增加,G1期细胞减少。肝癌细胞的生长增殖、克隆形成能力和凋亡指数在各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论MAGE-A3基因的过表达能提高肝癌细胞的迁移和侵袭能力,提示MAGE-A3基因与肝细胞癌的进展相关。

• 单位
  福建医科大学; 基础医学院; 福建省厦门市中山医院