人巨细胞病毒M抗原表位保守氨基酸突变的分析

作者：王本旭; 刘展; 刘玉; 沈倍奋; 柳川; 邵宁生

来源：生物工程学报, 2008, (07): 1128-1132.

• 人巨细胞病毒
• 抗原表位
• 突变 human cytomegalovirus(HCMV)
• epitope
• mutant

为确定人巨细胞病毒M抗原表位MAD的关键氨基酸残基,以MAD多肽序列为基础,分别将保守氨基酸残基单一突变为甘氨酸残基,构建各自突变体,然后与人源Fc的N端融合,通过原核表达载体pET32-Fc表达融合蛋白MAD-Fc,经proteinA柱亲和纯化得到各突变体纯品。通过ELISA及Western blotting方法验证各突变体特异结合羊抗HCMV多抗间的差异,从而确定表位关键氨基酸残基。结果显示,将MAD中的谷氨酰胺残基单突变为甘氨酸残基后,MADQ-G结合羊抗HCMV多抗活性大大降低,差异显著;而其他氨基酸残基单突变时,对MAD活性影响程度很小。由此得出结论:MAD结合羊抗HCMV多抗的活性...

• 单位
  中国人民解放军北京军区疾病预防控制中心; 军事医学科学院基础医学研究所