摘要

目的 观察氧化苦参碱(OM)对过氧化氢(H2O2)处理的大鼠胰腺腺泡AR42J细胞株高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达和释放的影响。方法 应用MTT法检测不同浓度H2O2处理对AR42J细胞生存率的影响。将体外培养的AR42J细胞分为对照组、H2O2组、H2O2+OM组。H2O2组及H2O2+OM组加入等容积的H2O2(终浓度0.16 mmol/L),对照组加入等容积三蒸水,H2O2+OM组在加入H2O2前0.5 h加入OM(终浓度0.5 g/L),培养24 h后收取细胞及细胞上清液。采用蛋白免疫印迹法检测细胞HMGB1蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测细胞上清液HMGB1蛋白水平,免疫荧光法检测HMGB1蛋白在细胞内的定位分布。结果 H2O2组细胞HMGB1蛋白表达量、分泌到细胞上清液中HMGB1蛋白量、细胞质HMGB1蛋白占细胞总HMGB1蛋白的比例均显著高于对照组[1.04±0.04比0.69±0.02,(4.84±0.13)μg/L比(2.68±0.07)μg/L,(35.7±2.5)%比(10.7±1.9)%],差异均有统计学意义(P值均<0.05);应用OM干预后,细胞HMGB1蛋白表达及分泌量、细胞质中HMGB1蛋白占比分别为0.82±0.02、(3.97±0.10)μg/L、(27.3±1.7)%,均显著低于H2O2组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 H2O2能够诱导大鼠胰腺腺泡细胞HMGB1的表达和释放,OM干预可减轻H2O2致AR42J细胞氧化应激损伤的程度。

  • 单位
    武警后勤学院; 消化疾病研究所