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摘要
利用实验室前期已获得的α-淀粉酶抑制剂基因(LASI),将其分别连接到不同载体上构建重组原核表达质粒，在原核表达系统中诱导表达LASI重组蛋白，并优化其诱导条件。通过Western Blot分析鉴定LASI重组蛋白，并采用碘-淀粉呈色法测定LASI对猪源淀粉酶的抑制活性。结果表明：pET28a是LASI的较好表达载体，当诱导时间为8 h, IPTG终浓度为1.0 mmol/L,诱导温度为27℃时，LASI重组蛋白的表达量达到最佳；在最优的诱导表达条件下，表达出的部分LASI重组蛋白以可溶性蛋白的形式存在，并能够与HIS标签单抗杂交；经纯化后获得的LASI重组蛋白对猪源淀粉酶存在抑制作用，终抑制比为34%。研究优化LASI重组蛋白的表达条件，获得足量的LASI重组蛋白，为进一步研究LASI的功能奠定基础。
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单位四川省农业科学院; 西南交通大学
