羊口疮病毒重庆分离株008基因的原核表达及生物信息学分析

作者：余远迪; 许国洋; 张素辉; 郑华; 付利芝; 杨柳^*

来源：西南农业学报, 2020, 33(06): 1309-1313.

DOI：10.16213/j.cnki.scjas.2020.6.032

• 羊口疮病毒
• 008基因
• 原核表达
• 生物信息学

【目的】研究羊口疮病毒008蛋白的功能,用原核表达系统表达008基因,并对其进行生物信息学分析。【方法】通过重庆临床分离株扩增得到008基因片段,将其连接到pET-28a(+)载体上,构建重组表达质粒,诱导表达该蛋白;对008蛋白利用ProtScale程序分析疏水性,TMHMM server v.2.0分析跨膜区,SignalP 5.0 server预测信号肽以及通过Protean进行B细胞抗原表位预测分析。【结果】羊口疮008基因可以在E.coli中表达,重组蛋白分子量大小约为56 kd,主要以包涵体形式表达且与阳性血清产生特异性结合反应,具有良好的抗原性。生物信息学研究显示,008蛋白属于疏水性蛋白,无跨膜区及信号肽区域,其中B细胞表位可能存在11个。【结论】构建的pET-28a(+)-008质粒在IPTG诱导下成功表达008蛋白,008蛋白具有良好的抗原性。

• 单位
  重庆市畜牧科学院