高抗黑胫病烤烟BAC文库的构建及分析

作者：董庆园; 马德清; 杨学; 刘勇; 黄昌军; 袁诚; 方敦煌; 于海芹; 童治军; 沈俊儒; 许银莲; 罗美中; 李永平; 曾建敏

来源：作物学报, 2020, 46(06): 869-877.

• 烟草
• 基因组DNA
• 细菌人工染色体(BAC)
• 基因筛选

烟草是重要的模式植物。本研究利用pIndigoBAC536-S载体及Hind III限制性内切酶酶解烟草基因组DNA的方法,构建了烟草新品系14-60的细菌人工染色体(BAC)文库。该文库共包含414,720个克隆,保存在1080块384板中。随机挑选的120个烟草BAC克隆检测结果表明,外源插入片段大小为97.0～145.5 kb,平均约为123 kb,空载率极低(0),覆盖烟草基因组11倍。用烟草hem A基因、eIF4E-1基因、NtFT基因的特异引物进一步验证,该文库质量高、可用性强,为烟草黑胫病抗性基因的克隆以及其他重要农艺性状和品质性状等功能基因克隆研究提供了基础资源。

• 单位
  云南农业大学; 华中农业大学; 云南省烟草公司临沧市公司; 云南省烟草农业科学研究院; 生命科学技术学院