天花粉蛋白突变体TCS_(RL28-29CG)的构建、表达与纯化

作者：王媛; 时莹; 刘梓谕; 徐志凯; 许晶; 黎志东

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2011, (04): 392-394.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005847

• 天花粉蛋白
• 人类免疫缺陷病毒
• 定点突变 trichosanthin
• human immunodeficiency virus
• site-directed mutagenesis

目的:构建天花粉蛋白(TCS)突变体基因,并进行表达及纯化。方法:应用计算机预测TCS分子上可能的抗原决定簇,并进行定点突变。以栝楼基因组DNA为模扳,经PCR扩增突变基因,与pRSET-A表达载体连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并对表达产物进行N i-NTA层析纯化。结果:目的蛋白在大肠杆菌中获得高效可溶性表达,表达产物经纯化后,得到均一的TCS突变体蛋白。结论:成功地构建了TCS突变体基因TCSRL28-29CG,并获得高效表达。

• 单位
  陕西省疾病预防控制中心; 第四军医大学