凉血散瘀法通过抑制巨噬细胞凋亡抗动脉粥样硬化的作用

作者：刘学谦; 王静; 曹守沛^*; 宋耀鸿^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2019, 25(03): 59-65.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20190336

• 凉血散瘀法
• 清心通脉饮
• 动脉粥样硬化
• 巨噬细胞
• 凋亡

目的:观察凉血散瘀法清心通脉饮含药血清对乙酰化低密度脂蛋白(acetylated low density lipoprotein,ac-LDL)诱导的小鼠单核巨噬细胞系RAW264. 7凋亡率及A型清道夫受体(type A scavenger receptor,SR-A),B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax),肌醇需要酶1α(inositol-requiring enzyme lα,IRE1α)表达的影响,探讨清心通脉饮治疗动脉粥样硬化可能的作用机制。方法:8只新西兰兔采用随机数字法分为阿托伐他汀组(2. 6 g·kg-1),清心通脉饮低、中、高剂量组(3. 33,6. 66,13. 32 mg·kg-1),灌胃7 d后颈动脉采血收集含药血清。各组用2. 5,5,10,20%体积分数的含药血清培养液分别刺激RAW264. 7细胞系6,12,24 h,采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法观察细胞增殖率。体外培养RAW264. 7细胞系,分为空白组、模型组、阿托伐他汀组、清心通脉饮低、中、高剂量组。空白组用牛血清白蛋白(BSA)培养细胞,模型组用BSA+50 mg·L-1ac-LDL刺激细胞24 h,其他组用BSA+50 mg·L-1ac-LDL+10%含药血清刺激细胞24 h。流式细胞技术检测每组RAW264. 7细胞系凋亡率和SR-A的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2,Bax,IRE1α蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组可显著增加RAW264. 7细胞凋亡率(P <0. 01),并增加Bax,SR-A蛋白表达(P <0. 01),减少Bcl-2蛋白表达(P <0. 05)。与模型组比较,清心通脉饮低、中、高剂量组均可降低RAW264. 7细胞系凋亡率(P <0. 05),减少SR-A和IRE1α表达(P <0. 05,P <0. 01)。清心通脉饮低、高剂量组可降低Bax表达(P <0. 05,P <0. 01);清心通脉饮中、高剂量组可降低Bcl-2表达(P <0. 05)。结论:清心通脉饮可降低巨噬细胞凋亡率,其治疗动脉粥样硬化机制可能与调控相关凋促亡蛋白Bax,IREα,SR-A和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。

• 单位
  南京市红十字医院; 南京中医药大学