富氢水对创伤性脑损伤大鼠炎性因子及线粒体损伤的影响

作者：付江泉; 兰青; 王迪芬; 汪颖; 刘颖

来源：中华危重病急救医学, 2018, 30(04): 317-321.

DOI：10.3760/cma.j.issn.2095-4352.2018.04.006

• 创伤性脑损伤
• 富氢液
• 线粒体损伤
• 炎症反应

目的观察富氢水对创伤性脑损伤(TBI)大鼠创伤周围脑组织线粒体损伤及炎症反应的影响。方法将54只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、创伤组(TBI组)及创伤+富氢水组(TBI+HW组),每组分为伤后1、3、7 d 3个亚组,每个亚组6只。采用改良Feency自由落体撞击法制备TBI大鼠模型;Sham组开颅窗后不予以颅脑撞击。TBI+HW组于制模后立即腹腔注射富氢水5 mL/kg,每日1次,直至处死;Sham组和TBI组均给予等量生理盐水。各组于伤后相应时间点进行神经损伤评分(NSS)后断头处死大鼠,取创伤边缘3 mm内脑组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎性因子水平,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2蛋白表达,用荧光酶标法检测线粒体活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)和线粒体膜通透性转换孔(MPTP)。结果 TBI组和TBI+HW组大鼠伤后出现明显神经功能损害,但TBI+HW组伤后3 d和7 d神经功能损害明显轻于TBI组[NSS(分):9.67±0.82比11.17±1.17,6.83±0.75比8.50±1.04,均P<0.05]。与Sham组比较,TBI组和TBI+HW组各时间点脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、ROS、Bax蛋白表达均明显升高,并于1 d达峰值后逐渐下降;各时间点MMP、MPTP及Bcl-2蛋白表达均明显下降,并于1 d达谷值后逐渐上升。与TBI组比较,TBI+HW组1 d起TNF-α、IL-1β、ROS、Bax蛋白表达即明显降低[TNF-α(ng/L):54.14±1.11比81.49±2.76,IL-1β(ng/L):74.53±1.75比119.44±3.56,ROS(RFU):92.30±2.46比121.33±6.57,Bax蛋白表达:0.89±0.01比1.10±0.01,均P<0.01],MMP、MPTP和Bcl-2蛋白表达即明显升高[MMP(RFU):99.28±3.97比74.72±3.00,MPTP(RFU):188.82±4.44比160.01±2.04,Bcl-2蛋白表达:0.52±0.02比0.30±0.02,均P<0.01]。结论大鼠TBI早期即有脑组织炎性因子表达增高及线粒体损伤;早期腹腔注射富氢液可减少线粒体损伤和炎性因子释放,减轻TBI后神经细胞凋亡,从而发挥脑保护作用。

• 单位
  贵州医科大学; 苏州大学附属第二医院