石斛合剂含药血清对高糖诱导小鼠足细胞损伤的保护作用

作者：陈勇; 林晓晖; 张捷平; 郑燕芳; 庄舒婷; 余文珍^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 1-8.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20231737

• 石斛合剂
• 糖尿病肾病
• 足细胞
• 铁死亡

目的: 探讨石斛合剂含药血清对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响及作用机制。方法：体外培养小鼠肾小球足细胞(MPC5)，筛选高糖造模浓度和时间以及石斛合剂含药血清最佳给药浓度；将细胞分为正常组(5.5 mmol·L-1葡萄糖+10%空白血清)、模型组(30 mmol·L-1葡萄糖+10%空白血清)、石斛合剂含药血清组(30 mmol·L-1葡萄糖+10%石斛合剂含药血清)，铁死亡抑制剂组(ferrostatin-1，Fer-1，30 mmol·L-1葡萄糖+10%空白血清+1 μmol·L-1 Fer-1)。采用试剂盒检测细胞中Fe2+、乳酸脱氢酶(LDH)水平；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞谷胱甘肽(GSH)、过氧化脂质(LPO)含量；荧光探针检测活性氧(ROS)水平；实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测足细胞中肾母细胞瘤基因1(WT-1)、结蛋白(Desmin)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)mRNA表达水平；蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测足细胞中WT-1、Desmin、ACSL4和GPX4蛋白表达水平。结果: 30 mmol·L-1高糖干预48 h可显著降低足细胞活力(P<0.01)，10%石斛合剂含药血清改善高糖诱导的足细胞活力最为显著(P<0.01)。与正常组比较，模型组足细胞内Fe2+、LDH、LPO、ROS水平及Desmin、ACSL4 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01)，GSH水平及WT-1、GPX4 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)；与模型组比较，石斛合剂含药血清组足细胞内Fe2+、LDH、LPO、ROS水平及Desmin、ACSL4 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05，P<0.01)，GSH水平及WT-1、GPX4 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05，P<0.01)。结论: 石斛合剂含药血清对高糖诱导的足细胞损伤具有保护作用，与其抑制铁死亡有关。

• 单位
  福建中医药大学