应用PCR-HRM技术快速筛查基因热点致病变异c.609G>A

作者：林书祥; 王朝; 张新杰; 徐晓薇; 邹倩倩; 蔡春泉; 张玉琴; 舒剑波^*

来源：中华医学遗传学杂志, 2020, 37(07).

• 高分辨率熔解曲线分析
• 钴胺素代谢障碍C型
• MMACHC基因
• 热点变异

目的对2个钴胺素代谢障碍C型(Cobalamin C,cblC)家系进行基因变异分析,在明确变异的基础上建立针对MMACHC基因热点致病变异c.609G>A的聚合酶链反应-高分辨熔解曲线(high-resolution melting, HRM)快速筛查方法。方法提取先证者及父母外周血基因组DNA;采用PCR-Sanger测序技术对cblC家系的MMACHC基因进行变异分析;通过PCR-HRM技术筛查100名健康儿童MMACHC基因变异c.609G>A。结果经Sanger测序确认先证者1MMACHC基因存在c.394C>T和c.609G>A复合杂合变异,先证者2MMACHC基因存在c.482G>A和c.609G>A复合杂合变异。先证者及100名健康儿童PCR-HRM分析结果与Sanger测序结果一致。结论 c.609G>A是MMACHC基因的热点致病变异,利用PCR-HRM技术对其进行筛查是cblC获得快速基因诊断有效方法。

• 单位
  神经内科; 天津市儿童医院