肺炎链球菌TaqMan实时荧光定量PCR的建立及临床应用

作者：吕东月; 刘和录; 何玥; 李培培; 梁鸿; 朱淑娥

来源：现代检验医学杂志, 2014, (5): 60-63.

DOI：10.3969/j.issn.1671-7414.2014.05.013

• TaqMan实时荧光定量PCR
• 儿童社区获得性肺炎
• 肺炎链球菌
• 快速检测

目的：建立TaqMan实时荧光定量PCR检测肺炎链球菌的方法，应用于临床儿童社区获得性肺炎（CAP）标本的快速筛查。方法根据 GenBank公布的肺炎链球菌自溶酶基因（lytA）设计引物和探针，建立实时荧光定量 PCR，并对体系进行优化；同时以痰培养法做双盲对照，应用于1504份 CAP患儿标本检测。结果 TaqMan实时荧光定量 PCR菌液的最低检出限可达18.75 cfu/PCR，无交叉反应，特异度好；对1504份儿童CAP标本检测，141份肺炎链球菌实时荧光定量PCR阳性，其中140份肺炎链球菌痰培养阳性，该方法灵敏度为100％，特异度为99.93％。从样品处理到结果报告仅需2.5 h。结论 TaqMan实时荧光定量PCR快速、简便、灵敏度高、特异度强，可用于儿童CAP中肺炎链球菌的初筛和指导抗生素的的合理使用。

• 单位
  广州医科大学