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摘要
目的利用噬菌体表面展示技术进行人源抗寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)噬菌体抗体库的构建及其基因工程单克隆抗体Fab段基因的获得和表达, 掌握人源噬菌体抗体库的制备和针对特定病毒高度特异性的抗体筛选方法。方法收集寨卡病毒病康复期患者的全血样本, 分离淋巴细胞, 采用RT-PCR方法成功地从淋巴细胞Ig mRNA中扩增出抗体轻链和重链Fab段基因, 利用pComb3H系统成功构建具有基因多样性的人源抗ZIKV噬菌体抗体库制备。利用已纯化的ZIKV和已获得的ZIKV E蛋白抗原对已建立的抗体库进行富集筛选。结果本研究成功地构建人源抗ZIKV噬菌体抗体库, 并获得针对ZIKV E蛋白抗原的单克隆抗体Fab段基因, 该基因能在大肠埃希菌中进行有效表达。结论根据其序列分析研究表明, 该单抗为一株新的抗ZIKV的人源基因工程抗体, 这对建立ZIKV快速特异的早期诊断方法, 获得特异性ZIKV人源治疗单抗奠定基础。
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