云南栘[木衣]叶片总RNA提取方法的比较与改进

作者:慈晓彤; 石辰; 王大玮*; 沈莲文; 何承忠; 蔡年辉; 段安安
来源:西北林学院学报, 2020, 35(03): 95-99.

摘要

高质量RNA的提取是开展云南栘[木衣]分子生物学研究的前提。采用OMEGA (Plant RNA Kit 50)试剂盒、TIANGEN(TRNzol-A+Reagent)试剂盒、CTAB法、Trizol法、SDS法及其改良法6种方法提取云南栘[木衣]叶片的RNA,并用琼脂糖凝胶电泳、核酸蛋白检测仪及RT-PCR技术比较了6种不同方法提取的总RNA样品的质量。结果表明,2种试剂盒法和trizol法不适合云南栘[木衣]RNA提取,无法得到28S、18SrRNA条带,CTAB法和SDS法虽能得到RNA的3条带,但拖带现象严重,A260/A230的比值较低,对SDS法进行改进,提高β-巯基乙醇的量,在缓冲液中增加PVP,使用HiBind RNA Mini柱,有效地抑制多酚多糖的污染,得到了较高质量、可用于RT-PCR扩增的云南栘[木衣]的RNA。对其开展分子生物学研究提供技术支撑。