BDNF的克隆及pTAT/HA-BDNF重组表达载体的构建

作者：王海珍; 刘鸣; 赵莘瑜; 张云汉; 许予明

来源：神经损伤与功能重建, 2008, (05): 304-306.

DOI：10.3870/sjsscj.2008.05.004

• 脑源性神经营养因子
• 反式激活因子
• 载体构建

目的:构建重组表达载体pTAT/HA-BDNF,探讨TAT携带BDNF穿透血脑屏障治疗中枢神经系统疾病的可行性。方法:从胚胎脑组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增,获得编码人BDNF的全基因序列,经回收、纯化、酶切后连接到含有TAT蛋白转导结构域序列的原核表达载体pTAT/HA上,将重组质粒pTAT/HA-BDNF转化大肠杆菌E.coli DH5α,筛选阳性克隆并酶切鉴定。结果:酶切鉴定及测序显示完全正确,BDNF基因的克隆和表达载体的构建成功。结论:经RT-PCR扩增得到特异性BDNF基因片段并成功构建pTAT/HA-BDNF重组表达载体。

• 单位
  郑州大学; 郑州大学第一附属医院; 第一附属医院神经内科