摘要
本试验旨在研究脂联素(APN)/脂联素受体1 (AdipoR1)/腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)信号通路在银杏叶提取物改善高脂饮食诱导的肥胖犬脂质代谢及脂肪沉积中的作用。试验选取雄性成年泰迪型贵宾犬50只,适应性饲喂2周后分成对照组(A组,n=6)和高脂饲粮组(n=44)。对照组饲喂基础饲粮,高脂饲粮组饲喂高脂饲粮(基础饲粮+25%猪油)。饲喂8周后高脂饲粮组成功建立肥胖犬模型,筛选30只肥胖犬,等分成5组:高脂饲粮对照组(B组,n=6)、银杏叶提取物组(C组,n=6)、阴性siRNA(N-siRNA)对照组(D组,n=6)、APN-siRNA组(E组,n=6)和AdipoR1-siRNA组(F组,n=6)。A组继续饲喂基础饲粮,其他各组继续饲喂高脂饲粮。C组、D组、E组和F组每天按50 mg/kg BW的剂量灌服银杏叶提取物,A组和B组灌服等量生理盐水。此外,D组、E组和F组在腹部皮下注射500μL siRNA,A组、B组和C组注射等体积生理盐水,每周3次。试验周期为4周。试验结束后,测量试验犬的体重及体脂率,测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及APN含量,苏木精-伊红(HE)染色观察脂肪细胞大小变化,分别用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法和Western blot法检测APN/AdipoR1/AMPK信号通路中相关分子基因表达和蛋白表达变化。结果显示:1)B组体重及体脂率显著高于A组与C组(P<0.05),C组体重及体脂率显著低于E组与F组(P<0.05)。2) B组血清TG、TC、LDL-C及APN含量显著高于A组与C组(P<0.05),HDL-C含量显著低于A组与C组(P<0.05);C组血清TG、TC、LDL-C含量显著低于E组和F组(P<0.05),HDL-C含量高于E组和F组(P<0.05)。3)C组和D组皮下脂肪组织中脂肪细胞面积显著小于B组、E组和F组(P<0.05)。4) C组脂肪组织中APN的mRNA和蛋白相对表达量显著高于B组与E组(P<0.05),AdipoR1的mRNA和蛋白相对表达量显著高于B组与F组(P<0.05),腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1(AMPKα1)的mRNA相对表达量和磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1(p-AMPKα1)的蛋白相对表达量显著高于B组、E组与F组(P<0.05)。综上所述,银杏叶提取物可以降低肥胖犬的体重、体脂率和血脂水平,这与银杏叶提取物激活脂肪组织APN/AdipoR1/AMPK信号通路,改善脂肪细胞脂质代谢与脂肪沉积的作用有关。
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单位江苏农牧科技职业学院