摘要
以1-(5-氟-2,4-二硝基-苯基)-4-甲基哌嗪(PPZ)为衍生化试剂,建立了一种测定氨基酸含量的柱前衍生化的高效液相色谱法(HPLC).色谱条件:采用Cica-reagent Mightysil RP-18 GP (3μm, 150 mm×4.6 mm)色谱柱,流动相为甲醇和水的混合液(甲醇和水的体积比为1∶1且混合液中含体积分数为0.2%的甲酸),流速为0.3 mL/min,紫外检测波长为354 nm,进样体积为2μL.衍生化条件:温度为40℃,反应时间为3 h,氨基酸与衍生化试剂的摩尔比为1∶10.对复方氨基酸胶囊(8-11)中的8种氨基酸进行测定显示,在0.5~1 000μmol/L浓度范围内工作曲线呈良好线性关系,且最低检测限为0.5~5.0μmol/L,加标平均回收率为90.0%~104.3%,相对标准偏差为0.57%~2.29%.由此表明该方法具有良好的灵敏度、重复性和准确度,可用于测定药物中氨基酸的含量.
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