磷酸化调控泛素单体与Rad23A/Ubiquilin-1中泛素结合域互作的检测

作者：冉梦琳; 覃凌云; 唐淳; 董旭^*

来源：波谱学杂志, 2019, 36(01): 15-22.

DOI：10.11938/cjmr20182652

• 泛素(Ub)
• 磷酸化
• 核磁共振(NMR)
• 蛋白质之间相互作用
• 泛素结合域(UBA)

泛素(ubiquitin,Ub)是一种广泛存在、高度保守的信号蛋白质,它能够特异性识别成千上万种靶蛋白,以非共价方式行使不同的功能,其中包含蛋白质降解.Ubiquilin-1(Ubql-1)和Rad23A作为两种蛋白降解的转运因子,都包含有与泛素结合的结构域,被称为泛素结合域(ubiquitin-associated domain, UBA).2014年,泛素S65位磷酸化修饰的特异性激酶PINK1被发现,磷酸化使泛素在溶液中呈现舒展态与收缩态两种互相转换的构象.本文通过核磁共振(nuclear magnetic resonance, NMR)技术对UBA和磷酸化泛素之间的相互作用进行检测,观测磷酸化对UBA和泛素结合的影响.实验结果表明Rad23A-UBA2与Ubql-1 UBA都特异性的与磷酸化泛素的舒展态相互作用,但是磷酸化未改变泛素与UBA之间的亲和力.值得注意的是与Ubql-1 UBA相互作用时,磷酸化促进了泛素收缩态向舒展态的转换.

• 单位
  波谱与原子分子物理国家重点实验室; 中国科学院大学; 中国科学院武汉物理与数学研究所