摘要
目的检测miR-497在乳腺癌组织中的表达水平,探讨其在乳腺癌细胞中的作用机制。方法 qRT-PCR法检测36例乳腺癌患者癌组织及癌旁组织中miR-497的表达水平;采用脂质体法将miR-497 mimics、mimics NC、miR-497 inhibitor和inhibitor NC分别转入MDA-MB-231乳腺癌细胞系,通过MTT实验和细胞迁移实验分析miR-497对MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力的影响;采用靶基因预测软件Targetscan human release7.1预测miR-497的靶基因,western blot验证miR-497 mimics、mimics NC、miR-497 inhibitor和inhibitor NC对靶基因蛋白的影响。结果 qRT-PCR结果显示,与癌旁组织(7.76±1.58)比较,miR-497在乳腺癌组织中的表达水平(2.12±1.04)明显降低(t=17.85,P<0.01);MTT实验结果显示,与mimics NC组[(104.36±3.25)%]比较,转染miR-497 mimics组[(67.56±4.11)%]的细胞增殖能力明显减弱(t=13.1,P<0.01);细胞迁移实验证实,与mimics NC组比较,转染miR-497 mimics后的细胞迁移能力减弱(272.3±8.5 vs 173.6±7.1,P<0.05);与inhibitor NC组比较,转染miR-497 inhibitor后细胞迁移能力增强(269.5±7.3 vs 346.1±13.5,P<0.01);靶基因预测软件预测HSP40可能是miR-497的靶基因;western blot结果显示,与mimics NC组比较,miR-497 mimics转染后的HSP40蛋白表达水平下调(P<0.01);而与inhibitor NC组比较,转染miR-497 inhibitor后其HSP蛋白的表达水平升高(P<0.01)。结论 miR-497可能通过靶向HSP40抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移,从而对乳腺癌进程起到调节作用。
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