Dhori病毒核蛋白抗原表位的筛选及鉴定

作者：张敏; 古丽娜孜·沙都汉; 刘利平; 王岚; 孙素荣; 张渝疆^*; 丁军涛^*

来源：中国人兽共患病学报, 2022, 38(11): 956-962.

• 蜱传Dhori病毒
• 核蛋白NP
• 改良生物合成肽法
• 最小抗原表位

目的 研究鉴定DHOV核蛋白(NP)的最小线性B细胞表位(BCEs),为DHOV的疫苗研制和预防奠定基础。方法 本研究针对DHOV-GRT169毒株NP蛋白进行生物信息学分析，采用改良生物合成肽法鉴定其BCEs。首先将DHOV NP蛋白截短为4个片段并鉴定其抗原性，将阳性片段继续截短成相互重叠8个氨基酸的16肽，将16肽序列分别克隆至原核表达载体pXXGST-3中表达，兔抗融合蛋白NP蛋白多克隆抗体作为一抗，用Western blotting检测16肽的抗原性，将检测出的阳性16肽都截短成相互重叠7个氨基酸的8肽，用同样的方法诱导表达及检测。最后用生物信息学方法分析每个BCEs在NP蛋白三维结构中的位置。结果 从NP蛋白中最终鉴定出9个BCEs,分别为Enp1(3NPTPKR8)、Enp2(7KRAEPGD13)、Enp3(83YUFFFL88)、Enp4(111NQTLTDE117)、Enp5(224QSQKAMLK231)、Enp6(227KAMLKQIF234)、Enp7(418LNAEFEEY425)、Enp8(421EFEEYSKL428)、Enp9(432GTGAFYER439),均位于NP蛋白表面。结论 这些鉴定的表位将提高对DHOV表位分布和致病机制的认识，为DHOV多表位检测抗原的开发提供基础，也可为DHOV感染与免疫机制研究提供理论依据。

• 单位
  新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心