摘要
目的建立视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia reperfusion injury,RIRI)模型,观察坏死性凋亡是否参与其病理过程。方法野生型C57小鼠随机分为对照组及实验组。对照组不做任何处理,实验组采用前房灌注法建立RIRI模型,并于RIRI后1 d、2d、4 d、7 d分别收集视网膜或眼球,行荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光染色检测受体相互作用蛋白(receptor interacting protein,RIP)3及RIP1、白细胞介素-1β、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、Caspase8的表达变化。结果荧光定量PCR检测RIP3、RIP1、白细胞介素-1β、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、Caspase8的mRNA表达,与对照组比较,实验组在不同时间点均有显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。RIP3及RIP1表达以早期升高为主,后期逐渐下降。Western blotting检测发现RIP3在RIRI后1 d及2 d显著升高,随后呈下降趋势。组织切片免疫荧光染色也发现RIP3在RIRI后1 d及2 d显著升高,随后呈下降趋势。结论实验性RIRI模型中,坏死性凋亡参与了其病理过程。坏死性凋亡特异性蛋白RIP3表达以早期升高为主,后期逐渐下降。
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