单核增生性李氏杆菌溶血素的原核表达及其单克隆抗体的制备

作者：罗正; 刘若尘; 郑世军

来源：生物工程学报, 2009, (11): 1652-1657.

DOI：10.13345/j.cjb.2009.11.011

• 单核增生性李氏杆菌
• 李氏杆菌溶血素
• 原核表达
• 单克隆抗体 Listeria monocytogenes
• listeriolysin O
• prokaryotic expression
• monoclonal antibody

为了深入研究单核增生性李氏杆菌(LM)致病机理,从其基因组中克隆李氏杆菌溶血素基因hly,并将其与原核表达载体连接在大肠杆菌BL21中表达携带His标签的李氏杆菌溶血素(LLO)融合蛋白,经镍柱纯化得到重组LLO蛋白作为免疫原并免疫小鼠。取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(Sp2/0)进行融合,经过3次亚克隆后获得3株稳定分泌针对LLO蛋白单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为Anti-LLO1、Anti-LLO2、Anti-LLO3;经ELISA测定其细胞培养上清效价分别为1:3.6×104、1:6.4×104、1:1.6×104,腹水效价分别为1:2×107、1:2×107、1:1×107;亲和力解离...

• 单位
  农业生物技术国家重点实验室; 中国农业大学