苍术酮对肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长、上皮-间充质转化和凋亡标志物表达的影响

作者：麦静愔; 陈澍; 柯碧莲; 何青青; 王浩艺; 平键; 陈建杰; 成扬

来源：中医药信息, 2022, 39(06): 28-32.

DOI：10.19656/j.cnki.1002-2406.20220606

• 苍术酮
• 肝癌
• 荷瘤小鼠
• 上皮-间充质转化
• 细胞凋亡

目的：研究苍术酮对肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长、上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)和凋亡标志物表达的影响。方法：在非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠左侧背部，皮下种植100μL的HepG2细胞悬液(1×10~7/只)。当注射位置肿瘤生长到50～100 mm~3之后，将18只小鼠随机分成对照组、苍术酮低剂量组(低剂量组)和苍术酮高剂量组(高剂量组)，每组6只。苍术酮溶于玉米油中，低、高剂量组分别按照5、10 mg/kg剂量灌胃给药；对照组仅给予玉米油灌胃。每日1次，共15 d。实验结束后处死小鼠，采集肿瘤瘤体组织待测。部分肿瘤组织置福尔马林中固定，石蜡包埋切片，进行免疫组化染色，用于检测Ki-67。部分肿瘤组织进行裂解抽提总蛋白，采用BCA法测定蛋白浓度，10%SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，半干法转移至硝酸纤维素膜，Western blot法检测EMT标志物(E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白和α-SMA)、EMT促进因子(MMP-2、MMP-9和TIMP-2)和凋亡相关因子(Bcl-2、Bax和裂解Caspase-3)的蛋白表达水平。结果：苍术酮治疗后荷瘤小鼠皮下肿瘤的体积和质量均明显下降，其作用呈现剂量依赖性。苍术酮组Ki-67阳性染色面积均显著缩小，尤其以高剂量组最为明显。Western blot检测结果显示，苍术酮干预显著上调了上皮标记物(E-钙黏蛋白)的表达，下调了间充质标记物(N-钙黏蛋白、波形蛋白和α-SMA)的表达；显著增加了TIMP-2的表达，降低了MMP-2和MMP-9的表达；降低了Bcl-2的表达水平，显著增加了Bax和裂解Capase-3的表达水平。结论：苍术酮具有一定的体内抗肿瘤效应，可抑制EMT和降低MMP减少肝癌细胞迁移和侵袭，通过凋亡途径促进肝癌细胞的凋亡。

• 单位
  上海中医药大学附属曙光医院; 上海市光华中西医结合医院; 上海市第一人民医院; 复旦大学附属华山医院