Gsα在肥厚心肌中的表达及敲除后对心脏发育的影响

作者：银萍; 赵奇; 石毓君; 苏立^*

来源：第三军医大学学报, 2021, 43(14): 1319-1325.

DOI：10.16016/j.1000-5404.202101167

• 主动脉弓缩窄
• 心肌肥厚
• 心脏发育
• Gsα
• 他莫昔芬
• 基因敲除

目的通过主动脉缩窄术(transverse aortic constriction, TAC)建立压力超负荷诱导心肌肥厚的小鼠模型,检测肥厚心肌组织中Gsα表达变化,同时构建诱导性心肌特异性Gsα缺失小鼠,观察Gsα缺失对幼鼠心肌发育的影响。方法 10只健康雄性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为手术组(TAC组,n=5)和假手术组(Sham组,n=5),TAC组小鼠行主动脉弓缩窄术,Sham组小鼠仅穿线而不缩窄主动脉。术后4周,采用超声心动图检测小鼠左心功能,运用病理组织染色观察小鼠心肌结构变化,利用RT-qPCR及Western blot检测小鼠心肌组织中Gsα表达;采用Cre-Loxp系统,将Gsαfl/fl小鼠与Myh6-MerCreMer小鼠杂交获得诱导性Myh6-MerCreMer+/-/Gsαfl/fl(MCM/Gsαfl/fl)小鼠。哺乳期MCM/Gsαfl/fl小鼠予腹腔注射他莫昔芬(tamoxifen, TMX, 20 mg/mL),连续10 d,通过哺乳方式将TMX传递给幼鼠,构建诱导性心肌特异性Gsα缺失幼鼠。记录幼鼠体质量增长以及生存率,利用病理组织染色观察心肌的结构变化。结果术后4周,超声心电图结果显示TAC组小鼠较Sham组小鼠舒张末期左室后壁增厚(P<0.01)、舒张末期室间隔增厚(P<0.05)、舒张末期左室内径减小(P<0.05),提示心肌发生了代偿性肥厚;组织病理学检测提示TAC组小鼠心肌横截面积显著增大(P<0.01),血管周围纤维化明显增加(P<0.01);RT-qPCR以及Western blot结果提示GsαmRNA及蛋白表达水平增加(P<0.05)。与玉米油诱导对照组相比,TMX诱导Gsα缺失的幼鼠出现生长迟缓、体质量显著降低(P<0.05);组织学染色提示TMX诱导的幼鼠心脏大小明显减小。结论 Gsα在压力超负荷诱导心肌肥厚心肌中的表达上调。Gsα敲除后幼鼠生长延迟、心脏发育受阻,提示Gsα可能参与心脏生理发育及后负荷增加所致代偿性心肌肥厚过程。

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院; 四川大学华西医院