外泌体介导miR-199a-3p靶向ARPC2基因对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

作者：樊松强; 张红森^*; 汤尧

来源：中国老年学杂志, 2022, 42(04): 934-939.

• 外泌体
• miR-199a-3p
• ARPC2
• 肾癌
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的 探讨外泌体介导miR-199a-3p对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法 提取HK-2、786-O细胞培养液中的外泌体，电镜下观察外泌体形态；将miR-NC、miR-199a-3p转染至786-O细胞后用去除外泌体的DMEM培养液培养48 h,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测外泌体中miR-199a-3p表达水平，Western印迹检测外泌体表面标志物CD63、CD81。将miR-NC、miR-199a-3p转染至786-O细胞中后加入外泌体进行培养，记为EXO-miR-NC组、EXO-miR-199a-3p组；将miR-199a-3p分别与pcDNA-NC、pcDNA-ARPC2共转染至786-O细胞中后加入外泌体进行培养，记为EXO-miR-199a-3p+pcDNA-NC组、EXO-miR-199a-3p+pcDNA-ARPC2组；将miR-NC、anti-miR-NC、miR-199a-3p、anti-miR-199a-3p、si-ARPC2、si-NC、分别转染至786-O细胞中，分别记为miR-NC组、anti-miR-NC组、miR-199a-3p组、anti-miR-199a-3p组、si-ARPC2组、si-NC组。qRT-PCR检测786-O细胞中miR-199a-3p表达水平；Western印迹检测786-O细胞中肌动蛋白相关蛋白2/3复合亚基(ARPC)2蛋白表达水平；四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率；Transwell检测细胞迁移和侵袭；荧光素酶报告实验检测miR-199a-3p和ARPC2的靶向关系。结果 HK-2和786-O细胞均有外泌体，miR-199a-3p在786-O细胞外泌体中低表达；过表达miR-199a-3p后786-O细胞外泌体中miR-199a-3p表达水平显著升高(P<0.05)。外泌体介导miR-199a-3p的肾癌细胞786-O细胞迁移数、存活率、侵袭数显著降低(P<0.05);敲减ARPC2肾癌细胞786-O细胞迁移数、存活率、侵袭数显著降低(P<0.05)。miR-199a-3p靶向调控ARPC2,高表达ARPC2部分逆转了外泌体介导的miR-199a-3p对786-O增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 外泌体介导的miR-199a-3p可抑制肾癌细胞增殖、迁移和侵袭，其机制可能与ARPC2有关。

• 单位
  新乡市中心医院; 漯河市第二人民医院