嵌合抗原受体修饰T细胞免疫治疗食管癌的实验研究

作者：丁辉; 谢甲贝; 李修岭; 韩双印^*; 周炳喜

来源：河南医学研究, 2023, 32(08): 1396-1399.

• 食管癌
• CAR-T
• 免疫治疗
• EGFRvⅢ

目的 观察嵌合抗原受体修饰T细胞(CAR-T)对人食管癌细胞EC109的体内外抗肿瘤作用。方法 以表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)为分子靶点、EC109-EGFRvⅢ为靶细胞，将二代CAR表达框克隆入慢病毒表达载体中，制备慢病毒并转染人外周血T细胞，采用乳酸脱氢酶(LDH)活性及干扰素γ(IFN-γ)等方法检测体外抗肿瘤作用，通过NSG小鼠移植瘤模型观察体内抗肿瘤作用。结果 表达质粒pEGFRvⅢ/CAR经限制性内切酶片段分析、基因检测及NCBI/Blast同源性分析确认各功能单位核苷酸序列准确无误、基因片段连接正确，流式细胞术检测慢病毒转染后T细胞EGFRvⅢ/CAR表达率为82%。效应细胞(EGFRvⅢ/CAR-T)和靶细胞(EC109-EGFRvⅢ)混合培养，LDH细胞毒性检测结果显示靶细胞裂解死亡与效/靶比呈正相关(E∶T为5∶1、10∶1、20∶1、40∶1),IFN-γ在E∶T为5∶1时与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。NSG小鼠皮下移植模型提示EGFRvⅢ/CAR-T对移植瘤有肿瘤抑制作用。结论 体外和体内实验显示CAR-T细胞对EC109-EGFRvⅢ有靶向杀伤作用，这为食管癌细胞免疫治疗提供了实验依据和研究基础。

• 单位
  河南省人民医院