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摘要
目的建立HPLC法同时测定叶下珠中没食子酸、短叶苏木酚、柯里拉京、老鹳草素、鞣花酸和芦丁6种成分含量的方法及指纹图谱分析方法。方法叶下珠以50%甲醇超声提取, 采用Phenonmenex Luna C18(4.6 mm×250 mm, 5 μm)色谱柱, 以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相, 梯度洗脱, 流速1.0 ml/min, 柱温25 ℃, 进样量10 μl, 检测波长270 nm。建立不同产地叶下珠HPLC指纹图谱, 采用主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘判别(OPLS-DA)分析不同产地叶下珠化学成分的差异性。结果没食子酸、短叶苏木酚、柯里拉京、老鹳草素、鞣花酸和芦丁分别在0.042 8～0.641 6、0.033 4～0.501 4、0.142 2～2.133 1、0.383 1～5.746 5、0.063 1～0.946 2、0.019 2～0.287 8 μg范围内与峰面积线性关系良好, 平均回收率分别为103.65%、96.39%、101.85%、95.04%、98.79%、98.33%。不同产地叶下珠HPLC指纹图谱共有14个特征峰, 鉴别指认其中6种化合物。PCA分析结果显示不同产地叶下珠所含化学成分具有差异性, OPLS-DA筛选出老鹳草素、鞣花酸和柯里拉京3个化合物为不同产地叶下珠的差异性成分。结论该方法高效、准确、灵敏度高, 可用于叶下珠药材中上述6种成分含量的测定, 建立的不同产地叶下珠HPLC指纹图谱结合6个特征性指标成分含量测定方法可用于叶下珠的质量控制评价。
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