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摘要
目的：观察急性髓性白血病（AML）患者异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）时、移植后及老年AML患者巩固化疗后，供者NK细胞输注的安全性。方法：入组40例AML患者，其中年龄>60岁AML完全缓解（CR）患者21例，allo-HSCT患者19例。采集健康直系亲属或供者外周血，密度梯度离心法分离单个核细胞，将细胞接种于NK细胞激活剂包被的培养瓶中，以重组人IL-15及IL-2细胞因子组合，优势扩增人NK细胞14 d。质检合格后进行静脉输注。台盼蓝拒染法计数细胞总数和活力，流式细胞术分析免疫细胞表型。AML患者巩固化疗后接受NK细胞输注，共78次；allo-HSCT患者移植时输注NK细胞11次，移植后3个月内输注NK细胞共32次。输注期间及之后48 h，记录患者体温、血压等，以观察细胞治疗的急性毒性，并记录急性移植物抗宿主病（GVHD）发生情况。结果：免疫表型分析显示，细胞扩增前外周血中NK细胞（CD3-CD56+）占单个核细胞的比例为（14.10±4.22）%(n=121)，培养14 d后CD3-CD56+细胞比例为（87.29±8.75）%(n=121),NK细胞增殖倍数为753.47±140.13倍（n=121）。NK细胞输注量为每次（7.58±2.50）×107/kg，其中3例患者各有1次输注出现低至中度发热，且均为多次输注后出现，对症处理后当天体温均恢复正常。1例4次输注均有发热，最高体温在38.5-39.0℃，给予对症处理后，体温在1-2 h内降至正常，后无任何不适。老年AML患者均未发生GVHD，移植患者6例发生急性GVHD，其中I度5例，Ⅱ度为1例。结论：采用该体系可获得高纯度的NK细胞，用于白血病造血干细胞移植及老年AML患者，细胞输注是安全的。
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