CDK5介导的PPARγ磷酸化在动脉粥样硬化泡沫细胞形成过程中的作用

作者：沈娜; 贺晶; 邸研博; 刘勇; 田凤石; 刘运德^*

来源：天津医药, 2019, 47(10): 1045-1049.

• 动脉粥样硬化
• 泡沫细胞
• 细胞周期蛋白依赖激酶5
• 过氧化物酶体增殖物激活受体
• CD36
• SR-A1
• ABCA1
• ABCG1

目的探讨细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)介导的过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)磷酸化在动脉粥样硬化中的作用。方法常规培养小鼠Raw264.7巨噬细胞,实验设对照组(C组)、氧化低密度脂蛋白(oxLDL)组(O组,50 mg/L ox-LDL)、Roscovitine+ox-LDL组(R组,15μmol/L Roscovitine+50 mg/L ox-LDL)。待细胞融合至70%左右,R组加入15μmol/L Roscovitine预处理30 min,之后O组和R组分别加入50 mg/L ox-LDL继续培养24 h,使其转化为泡沫细胞;C组不作处理。利用Western blot检测各组pPPARγ、tPPARγ、p35和CDK5蛋白表达的变化,油红O染色和异丙醇萃取实验分析各组细胞内脂质聚积情况,酶法测定细胞内胆固醇含量,反转录PCR(RT-PCR)检测各组ox-LDL摄取相关基因CD36、SR-A1和胆固醇外流相关基因ABCA1、ABCG1的mRNA表达水平。结果 oxLDL诱导后,O组pPPARγ/tPPARγ比值、p35/CDK5比值、细胞内脂质聚积、总胆固醇含量、游离胆固醇含量、胆固醇酯/总胆固醇比值均较C组明显升高(P<0.05);CDK5抑制剂干预后,R组上述指标均较O组降低(P<0.05)。RTPCR结果显示,ox-LDL诱导后,O组ox-LDL摄取相关基因CD36、SR-A1的mRNA表达水平升高,而胆固醇外流相关基因ABCA1、ABCG1的mRNA表达水平降低(P<0.05);CDK5抑制剂干预后,上述指标变化与O组呈相反趋势(P<0.05)。结论 CDK5/pPPARγ途径参与动脉粥样硬化泡沫细胞的形成。

• 单位
  天津市第四中心医院; 天津医科大学; 中心实验室