扶肝化纤汤对肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响

作者：肖政华^*; 杨辉; 雷伟; 杨君; 易旭; 谭敏敏

来源：山东大学学报(医学版), 2019, 57(06): 51-80.

• 扶肝化纤汤
• TGF-β1/Smad信号通路
• 肝纤维化
• 病证结合
• 模型大鼠

目的研究扶肝化纤汤对正虚毒蕴血瘀病证结合肝纤维化(HF)模型大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响,探讨其抗HF的作用机制。方法清洁级SD大鼠120只,随机等分为正常组、模型组、秋水仙碱组、扶肝化纤汤高、中、低剂量组。除正常组外,其余各组在经典四氯化碳(CCL4)皮下注射制备大鼠HF模型的基础上,以中医理论指导,建立正虚毒蕴血瘀型HF大鼠模型。造模6周验证模型,造模成功后,给药组相应灌胃给药,正常组和模型组给予等体积纯净水,均连续灌胃3周。末次灌胃的次日,检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)、羟脯氨酸(HyP)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)的含量,肝组织行HE染色和Masson染色。用qRT-PCR、免疫组化法检测各组肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)、果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白3(Smad3)、果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白7(Smad7)及其mRNA的表达。结果病理结果显示,与模型组比较,各给药组肝细胞损伤程度减轻,胶原纤维的增生减少; HE染色结果显示,肝纤维化程度分期好转(χ2=54.722,P<0.01); M asson染色结果显示,肝脏胶原纤维面积占比减少(χ2=52.149,P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠血清ALT(χ2=39.685,P <0. 01)、AST (F=659. 984,P <0. 01)、Hyp(χ2=38. 613,P <0. 01)、LN (χ2=50.057,P<0.01)、PⅢNP(F=63.492,P<0.01)升高、ALB(χ2=51.908,P<0.01)下降,肝组织TGF-β1(χ2=40.900,P<0.01)、Smad 3(χ2=38.253,P<0.01)、TGF-β1 mRNA(F=92.304,P<0.01)、Smad 3 mRNA (F=119.563,P<0.01)表达升高,Smad 7(χ2=48.949,P<0.01)及Smad 7 mRNA (F=42.120,P<0.01)表达降低;与模型组比较,扶肝化纤汤不同剂量组均抑制上述指标的改变(P<0.01),且呈现出扶肝化纤汤高剂量组优于其余给药组(P<0.01)。结论正虚毒蕴血瘀病症结合HF模型大鼠建模成功。扶肝化纤汤具有保护肝细胞、减轻肝损伤、抑制HF的作用。扶肝化纤汤能够调控TGF-β1、Smad3、Smad7及其mRNA的表达,可能是其抗HF的作用机制之一。

• 单位
  第二临床医学院; 中心实验室; 贵州中医药大学; 神经内科