重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体在毕赤酵母中的表达及活性检测

作者：石胜; 钟华; 马玲; 农江; 白安斌; 陈凤莲; 吴健敏

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, (06): 629-632.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006450

• CD22
• 人CD22抗体
• B细胞淋巴瘤
• 毕赤酵母 CD22
• anti-human CD22 antibodies
• B-cell lymphoma
• P.pastoris

目的:采用酵母多拷贝分泌表达载体pPIC9K表达重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体cRFB4FC和cRFB4CH3,并进行活性检测。方法:采用基因克隆技术获得两抗体的基因,然后将其克隆入表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K/cRFB4FC和pPIC9K/cRFB4CH3,经测序鉴定正确,电转化入毕赤酵母SMD1163中,将经G418抗性筛选出的重组酵母菌株进行PCR鉴定,经甲醇诱导,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,经ELISA检测生物学活性。采用正交试验优化重组酵母菌株的表达条件以提高抗体的表达量。结果:获得重组表达质粒pPIC9K/cRFB4FC和...

• 单位
  广西壮族自治区兽医研究所; 广西民族大学; 中国人民解放军第三〇三医院