摘要

目的 为了探究埃及伊蚊多巴脱羧酶(Dopadecarboxylase,DDC)基因在蚊卵发育过程中所发挥的功能。方法首先通过荧光定量PCR技术构建DDC基因在埃及伊蚊中的时空表达谱,然后利用RNAi技术沉默埃及伊蚊成蚊DDC基因的表达,比较分析实验组与对照组的产卵量、卵孵化率和卵抗干燥能力。结果 DDC基因在卵时期表达量高于其它年龄阶段幼虫,在不同生长发育周期中相对表达量最高,在不同组织的相对表达量中,DDC基因在卵巢中转录本表达量水平约为胸部的5.35倍,是表皮和中肠的6.63倍和38.9倍。两个对照组间的产卵量和卵孵化率均无显著性差异(DEPC组产卵量和卵孵化率分别为122个/只蚊和95.1%,P>0.05;dsGUS组产卵量和卵孵化率分别为120个/只蚊和92.9%,P>0.05)。但实验组(dsDDC注射组)的产卵量(39个/只蚊)和孵化率(10%)均显著低于对照组(P<0.0001)。在低湿度条件下(室温26℃,0-5%湿度),0~10 min之内,对照组蚊卵壳结构和饱和度基本无变化,而dsDDC组蚊卵壳结构出现坍塌,卵饱和度明显下降;30分钟之后,dsDDC组蚊卵已脱水干瘪,而两组对照组蚊卵仍保持较高的饱和度。结论 基于以上结果,本研究初步推断DDC基因从埃及伊蚊卵的形成到发育过程起到重要的调控作用。