组蛋白去甲基化酶LSD1去除亲代组蛋白H3K4me2促进复制偶联的核小体装配

作者：杨笑菡

来源：延安大学学报(医学科学版), 2023, 21(03): 16-22.

DOI：10.19893/j.cnki.ydyxb.2023-0192

• 复制
• 核小体装配
• 组蛋白H3K4去甲基化酶
• 组蛋白甲基化

目的 探索真核细胞内影响与调控复制偶联的核小体组装及解聚的表观遗传学机制。方法 人骨肉瘤细胞系（U2OS）转染对照和组蛋白H3K4去甲基化酶（lysine-specific demethylase 1, LSD1）siRNA，双胸苷阻滞或胸苷-诺考达唑联合阻滞同步化细胞，释放后在不同时间点进行流式细胞术分析，检测LSD1敲低对细胞周期的影响；免疫印迹试验检测LSD1 siRNA敲低效率；U2OS细胞同步化后进行免疫荧光共聚焦显微镜观察，检测LSD1、组蛋白H3K4二甲基化、一甲基化（H3K4me2/1）在细胞周期中的表达水平；U2OS细胞转染对照、LSD1 siRNA后进行微球菌核酸酶（micrococcal nuclease, MNase）消化后检测核小体装配效率；免疫共沉淀实验检测与LSD1存在相互作用的体内蛋白。结果 组蛋白H3K4去甲基化酶LSD1能促进复制偶联的核小体装配。结论 复制前期LSD1催化亲代组蛋白H3K4me2去甲基化，导致H3K4me2被清除至一定水平，有助于复制偶联的核小体装配。本研究不仅揭示了LSD1之前未被阐明的生物学功能，同时拓宽了对表观遗传生物学功能的认知。

• 单位
  基础医学院; 北京大学