摘要
目的:构建携带Runx3-flag的腺病毒载体,通过感染PC-3前列腺癌细胞,分析其在PC-3中的表达及定位。方法:将Runx3-flag连接至pShuttle-CMV上构建出pShuttle-CMV-Runx3-flag,线性化后转化至E.coliBJ5183-AdEasy-1内进行同源重组,抽提质粒鉴定正确的即为pAd-Runx3-flag,PacI酶切回收后转染人胚肾293细胞,经过包装、扩增和纯化后,半数组织感染量法(TCID50)测定病毒滴度。以pAd-Runx3-flag感染PC-3细胞,westernblot检测Runx3-flag的表达,间接免疫荧光分析其定位。结果:构建了包含...
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单位西京医院; 第四军医大学