IFN-γ和TNF-α联合对MIN6细胞caspase-3活化的影响

作者：曹朝晖; 覃剑; 董世访; 郑权友; 杨菲; 谭雨龙; 尹卫东; 李桂清

来源：免疫学杂志, 2014, 30(01): 17-20.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20140004

• IFN-γ
• TNF-α
• MIN6细胞
• Caspase-3
• Ⅰ型糖尿病

目的研究细胞因子IFN-γ和TNF-α对小鼠胰岛瘤细胞株MIN6中caspase-3活化的影响。方法用IFN-γ、TNF-α单独或联合刺激MIN6细胞后,Western blot分析比较caspase-3活化的情况,并用免疫细胞化学法检测了其活化产物cleaved caspase-3的产生;酶学比色法测定细胞因子IFN-γ和TNF-α联合作用活化caspase-3的时间依赖性以及MTT法比较caspase-3特异性的抑制剂AC-DEVD预处理前后MIN6细胞活性的变化。结果 IFN-γ或TNF-α单独作用不能活化caspase-3,但两者联合作用24 h后可检测到caspase-3活化裂解片段的产生;Caspase-3的活性随着IFN-γ和TNF-α处理时间的增加而升高,呈现明显的时间依赖性;抑制caspase-3的活化可有效改善MIN6细胞的活性,并且呈剂量依赖性。结论 IFN-γ和TNF-α对MIN6细胞活性的抑制作用与caspase-3的活化密切相关。

• 单位
  重庆医科大学; 南华大学; 第三军医大学; 中心实验室; 大坪医院